搜集ELISA樣本前的完好的方案

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在搜集樣本前都必須有一個完好的方案，必須清楚要檢測的成份是否滿足安穩(wěn)。對搜集后當天就進行檢測的樣本，及時儲存在4℃?zhèn)溆?。關于隔天再檢測的樣本，及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，有條件的，-70℃凍存?zhèn)溆?。研域生物提示，標本應防止重復凍融?

液體類標本: 包含血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培育上清等。
1. 血清：
室溫血液天然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。細心搜集上清。保存過程中如有沉積構成，應再次離心。
2. 血漿：
應根據(jù)標本的要求挑選edta、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。細心搜集上清。保存過程中如有沉積構成，應再次離心。
3. 尿液：
用無菌管搜集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。細心搜集上清。保存過程中如有沉積構成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實施。ELISA試劑盒
4. 細胞培育上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管搜集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。細心搜集上清。
5. 培育細胞
檢測細胞內的成份時，用pbs（ph7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度到達100萬/ml左右。經過重復凍融或參加安排蛋白萃取試劑，以使細胞損壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。細心搜集上清。保存過程中如有沉積構成，應再次離心。
6. 安排標本
切割標本后，稱取分量。參加一定量的pbs，ph7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本消融后依然堅?-8℃的溫度。參加一定量的pbs（ph7.4），或安排蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。細心搜集上清。分裝后一份待檢測，其他冷凍備用。

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