上海通蔚生物科技有限公司ELISA試劑盒在免疫學研究中的應用解析

一、核心作用機制

ELISA試劑盒基于抗原-抗體的特異性結合原理，通過酶促顯色反應實現(xiàn)生物標志物的定量檢測。其固相化抗體/抗原與樣本中的靶標結合后，利用酶標二抗催化底物顯色，顏色深淺與目標物濃度呈正相關?。該方法靈敏度可達皮克級，適用于血清、血漿等體液樣本的微量分析?。

二、實驗流程與操作要點

?樣本預處理?

需對血清、細胞培養(yǎng)液等樣本進行離心過濾，去除雜質與細胞碎片，確保檢測準確性?。

?加樣與孵育?

將處理后的樣本加入包被特異性抗體的微孔板（每孔100μL），37℃孵育30-60分鐘促進抗原-抗體結合?。

?洗滌與標記?

洗滌4-6次去除未結合物后，加入酶標二抗進行二次孵育，形成抗體-抗原-酶標復合物?。

?顯色與讀數?

加入TMB等底物避光顯色10-30分鐘，終止反應后通過酶標儀測定450nm波長吸光度值，計算靶標濃度?。

三、檢測方法分類

四、免疫學研究應用場景

?傳染病機制研究?

定量檢測病原體抗體（如HIV、乙肝病毒），分析感染進程與免疫應答動態(tài)?。

?自身免疫病分析?

通過檢測抗核抗體、類風濕因子等自身抗體，輔助紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎的病理研究?。

?過敏與免疫調節(jié)?

測定血清IgE水平，解析花粉、塵螨等過敏原的免疫反應強度?。

五、質量控制要點

?復孔設置?：每個樣本需做2-3個復孔，減少操作誤差?。

?洗滌規(guī)范?：每次洗板需浸泡30秒以上，徹底去除非特異性結合物?。

?標準曲線?：必須同步繪制標準品濃度梯度，確保定量可靠性?。

ELISA試劑盒憑借高靈敏度與標準化操作流程，已成為免疫學研究中抗體檢測、細胞因子分析及免疫應答評估的核心工具。隨著夾心法、化學發(fā)光法等技術的迭代，其在精準醫(yī)學研究中的應用將進一步拓展?。